An dem Projekt und der Umsetzung beteiligten sich die größten Künstler der Zeit: Giorgio Vasari, Jacopo Barozzi da Vignola und Bartolomeo Ammannati. Seit 1889 beherbergt es das Museum der Villa Giulia, das ursprünglich als Museum der vorromaischen Antiken, insbesondere der Falisker, gegründet wurde und heute als das repräsentativste Etruskermuseum bezeichnet werden kann. Es ist reich an Zeugnissen aus dem südlichen Etrurien, also dem Gebiet zwischen dem Tiber und dem Tyrrhenischen Meer (Oberlazium).
Es sind einige der bedeutendsten etruskischen Kunstwerke zusammen mit hochrangigen griechischen Schöpfungen ausgestellt, die zwischen dem 8. und 4. Jahrhundert v. Chr. nach Etrurien importiert wurden. Die Ausstellung der Werke folgt einem topographischen Prinzip: Neben den großen etruskischen Zentren wie Vulci, Cerveteri und Veio werden auch kleinere Stätten des vorromaischen Italiens dargestellt (Agro Falisco, Latium Vetus, Umbrien).
Die Ausstellung umfasst außerdem bedeutende Antiquitätensammlungen, bestehend aus dem Kern des barocken Kircher-Museums, Materialien der Sammlungen Barberini, Pesciotti und vor allem der sehr umfangreichen Castellani-Sammlung, die aus Keramiken, Bronzen und den berühmten antiken und modernen Goldschmiedearbeiten besteht, letztere Werke der Castellani selbst, bekannten Goldschmieden in Rom in der zweiten Hälfte des 19. Jahrhunderts.
Weltberühmt sind der Sarkophag der Verliebten aus Cerveteri (6. Jh. v. Chr.), die Apollostatue aus Terrakotta von Veio (6. Jh. v. Chr.), das Relief und die Goldbleche in etruskischer und phönizischer Sprache aus Pyrgi (5. Jh. v. Chr.), der Apollo Scasato aus Falerii (4. Jh. v. Chr.), der Zentaur aus Nenfro von Vulci (6. Jh. v. Chr.), die orientalisierten Komplexe aus Palestrina (7. Jh. v. Chr.).

